X-33是毕赤酵母菌株,属于真核细胞。一般的针对原核生物的抗生素例如卡那和氨苄对酵母是无效的,因此为了防止大肠杆菌等原核生物对酵母培养菌株污染,往往会在培养基中加入一些氨苄和卡那霉素的抗生素,来抑制细菌菌的污染和生长。毕赤酵母适宜的生长温度是28至30度,温度超过32度对蛋白的表达是有害的,并可能导致细胞的死亡。
X-33毕赤酵母可以在YPD培养基中生长。
X-33毕赤酵母被推荐用来表达含有Zeocin抗性的载体载体重组质粒,例如pPICZ A,B,C系列的载体。
在筛选X-33重组转化菌株时,Zeocin抗生素的工作浓度是100 ug/ml。
X33毕赤酵母含有AOX1基因,产生的转化株是Mut+基因型。
X-33化学感受态细胞经氯化钙处理,促进质粒 DNA 黏附于X-33感受态细胞膜上,通过将X-33感受态细胞通过水浴热激,使细胞膜孔打开,从而质粒可以进入。化学感受态细胞是常规克隆和亚克隆实验应用的最佳解决方案。
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