pColdS-SUMO2原核表达载体

载体基本信息

载体说明

pCold-SUMO2原核表达载体是在 pCold-SUMO1载体基础上将step II(TGGAGCCACCCGCAGTTCGAAAAA)标签加在Xba I和终止密码子之间改造而成，该载体启动子(CS Promoter)来源于南极嗜冷细菌，在低温下(15 度)才能启动蛋白的表达。低温下细菌生长缓慢，使得蛋白合成速度减慢，从而最大限度的提高了蛋白正确折叠的几率，提高了蛋白可溶性表达，增强了活性蛋白的表达比率。该表达系统所包含的 SUMO tag可以极大地提高小分子量蛋白的表达量，而且进一步提高了蛋白的可溶表达几率。同时，试剂盒配备的SUMO Protease(含6×His标签)可特异性去除 SUMO tag，从而得到不含任何标签的重组蛋白。TEE信号肽可增强冷启动子调控下目的蛋白的高表达。BL21(DE3)Chaprone E.coli 细菌中含有分子伴侣蛋白质粒，其表达产物可协助重组蛋白正确折叠形成可溶活性蛋白。
分子伴侣蛋白质粒为氯霉素抗性(chloramphenicol，Cmr)的表达受控于四环素(tetR)操纵子。